Caracterización de ratones carentes de cromogranina B mediante técnicas electroquímicas y conductuales

  1. GONZALEZ MORALES, YEZER
Supervised by:
  1. Ricardo Borges Jurado Director
  2. Jose Francisco Gomez Gonzalez Co-director

Defence university: Universidad de La Laguna

Fecha de defensa: 14 January 2010

Committee:
  1. Joaquín Jordán Bueso Chair
  2. Ernesto Pereda de Pablo Secretary
  3. J. M. Hernández Guijo Committee member
  4. Eva Alés González de la Higuera Committee member
  5. Carmen Marina Alvarez Garcia Committee member
Department:
  1. Medicina Física y Farmacología

Type: Thesis

Teseo: 285161 DIALNET

Abstract

En esta tesis se busca caracterizar ratones mutantes carentes de cromogranina B mediante tanto técnicas electroquímicas como son la voltametría cíclica, amperometría convencional y amperometría intracelular, como métodos conductuales. Este estudio tuvo como objetivo responder los siguientes apartados. 1. Determinar posibles cambios en la conducta de los ratones carentes de cromogranina B mediante test conductuales y desarrollo de técnicas de imagen para el análisis de los mismos. 2. Comprobar si hay cambios en los niveles de neurotransmisores en el citosol y en los gránulos intravesiculares de las células cromafines sin cromogranina B, con respecto a las células control, mediante voltametría cíclica y amperometría intracelular. 3. Estudiar la exocitosis de neurotransmisores por medio de la amperometría convencional. 4. Desarrollar modelos matemáticos que ayuden a comprender los efectos de la ausencia de la cromogranina B en el fenómeno de la liberación de neurotransmisores en la célula cromafín. 5. Por último, queremos defender el papel que un físico puede y debe interpretar en un laboratorio de investigación biológica. Para ello se enumeran una serie de aportaciones que, sin una relación unívoca con el tema de esta tesis, han contribuido a mejorar la labor de los miembros del equipo de investigación del que he formado parte. De donde se concluyó que: 1. Los ratones carentes de cromogranina B presentan diferencias conductuales con respecto a los ratones WT. Los ratones CgB-KO son más agresivos y tienen una mayor actividad exploratoria que los ratones WT. 2. La cantidad de catecolaminas dentro de las vesículas secretoras de la célula cromafín es menor en los ratones CgB-KO que en los WT, teniendo estas últimas una mayor capacidad de almacenamiento de catecolaminas. 3. La cinética de las espigas amperométricas presenta diferencias entre los ratones CgB-KO y WT. Las espigas CgB-KO tienen menor amplitud y carga que las WT, además, se observa una desaceleración de la exocitosis en la parte de ascenso de las espigas CgB-KO. 4. La matriz proteica intravesicular es la responsable de la modulación de liberación de neurotransmisores. La supresión de CgB y sobreexpresión de CgA en la matriz produce un cambio estructural en la misma, y en consecuencia, un cambio en la modulación.