Regulación de la infección por vih-1 mediante el control de la formación del poro de fusión, por alteración del tráfico de membrana y la reorganización del córtex de actina

  1. García Expósito, Laura
Dirigida por:
  1. Agustin Valenzuela Fernandez Director

Universidad de defensa: Universidad de La Laguna

Fecha de defensa: 23 de febrero de 2012

Tribunal:
  1. José Manuel Siverio Expósito Presidente
  2. José David Machado Ponce Secretario
  3. Pedro Lorenzo Majano Rodríguez Vocal
  4. Maria Jesus Dominguez Luis Vocal
  5. Cristina Risco Ortiz Vocal
Departamento:
  1. Medicina Física y Farmacología

Tipo: Tesis

Teseo: 318621 DIALNET

Resumen

Durante el desarrollo de esta Tesis Doctoral, hemos demostrado que la alteración de la dinámica de la membrana asociada a PIP2 y coordinada por la GTPasa Arf6, ya sea mediante la interferencia específica de la proteína Arf6 endógena o mediante la sobreexpresión de mutantes activos o inactivos del ciclo GTPasa de Arf6, unidos a GTP o GDP respectivamente, bloquea los primeros estadios de la infección de linfocitos T CD4+ por el VIH-1. Observamos que la sobreexpresión de los mutantes Arf6-Q67L y Arf6-T44N inducen la acumulación de estructuras asociadas a PIP2 en la membrana plasmática de células permisivas, como se visualizó mediante la utilización de una sonda de detección de PIP2, PH-ECFP. Este hecho es indicativo de la modificación del tráfico de membrana asociado a vesículas de PIP2 desde y hacia la superficie celular. Asimismo, la expresión de los mutantes Arf6-Q67L, Arf6-T44N, Arf6-T27N y Arf6-N48I/Q67L en células permisivas inhibe las primeras etapas de la infección viral, que indica que el ciclo GTPasa Arf6-GTP/GDP regula la fusión, entrada e infección eficiente del VIH-1. Por otro lado, hemos demostrado que la modificación del citoesqueleto de actina cortical por sobreexpresión de la proteína de unión y corte de F-actina gelsolina, afecta negativamente al agrupamiento de los receptores CD4-CXCR4 o CD4-CCR5 de manera dependiente de actina e inducido por la envuelta gp120 del VIH-1. Igualmente, la sobreexpresión de una construcción funcional de gelsolina, reduce el contenido de F-actina celular cortical disminuyendo la migración de células T en respuesta a un gradiente quimiotáctico mediado por la quimiocina SDF-1alfa, sin afectar a la endocitosis de CXCR4 inducido por ligando.