Caracterización de actividades enzimáticas codificadas por el elemento line l1tc de trypanosoma cruziimplicación en el mecanismo y control de la transposición

  1. Jose Luis Garcia Perez
Supervised by:
  1. Manuel Carlos López López Director

Defence university: Universidad de Granada

Year of defence: 2002

Committee:
  1. Carlos Alonso Bedate Chair
  2. Enrique García Olivares Secretary
  3. Carmen Maroto Vela Committee member
  4. Dolores González Pacanowska Committee member
  5. Enrique Martínez Carretero Committee member

Type: Thesis

Teseo: 93916 DIALNET

Abstract

La presente tesis analiza diferentes actividades enzimáticas codificadas por el elemento móvil de tipo LINE L1Tc del parásito humano, Trypanosoma cruzi. Una primera parte de esta Tesis analiza tres actividades enzimáticas codificadas por el elemento, las cuales participan en el mecanismo de su transposición. Así, en primer lugar se presentan resultados donde se observa reparación del DNA asociada a la región con homología a proteínas con actividad endonucleasa AP presente en este elemento; dicha reparación se observada in vivo, sobre el parásito T.cruzi, utilizando diversos agentes que atacan al DNA, como radiación gamma y el tratamiento con el citotóxico daunorubicina. Posteriormente es analizada la fidelidad de la enzima con actividad RT del elemento L1Tc, siendo esta la primera descripción de la fidelidad de una enzima RT procede de un elemento móvil de tipo LINE. Los resultados obtenidos muestran que si bien la enzima RT del citado elemento LINE L1Tc posee una similar tasa de fidelidad a otras RT de origen retroviral, muestra una tendencia al intercambio de molde (template switching) durante el proceso de polimerización, no observada con la RT control utilizada de origen retroviral. Otra actividad enzimática analizada se corresponde con la actividad Rnasa H. En los resultados presentados se muestra la existencia de dicha actividad asociada al elemento LINE L1Tc, siendo igualmente la primera descripción de la presencia de una actividad enzimática de este tipo, asociada a un elemento de tipo LINE. La caracterización de esta actividad muestra que a diferencia de la enzima retroviral NIV-1 utilizada, la actividad Rnasa H codificada por el elemento L1Tc muestra se activa sobre secuencias de RNA ricas en purinas, presentando además un significativo mayor rango de actividad respecto al valor de pH y temperatura de la reacción RNasa H. La descripción de esta actividad asociada a un elemento LINE refuerza e