Estudio de factores implicados en la regulación de la expresión del elemento linel1tc de trypanosoma cruzi y del mecanismo de su retrotransposición de novo

Abstract

Estudio de la retrotransposición in vivo del elemento movil LINE L1Tc de T. cruzi mediante la construcción de vectores que portan copias funcionales de L1Tc que han sido marcadas con un casete que porta el gen que confiere resistencia a puromicina e interrumpido por el intrón PAP de este parásito mediante tranfección de los parasitos y detección de eventos de retrotransposición de novo mediante selección con puromicina. Por otro lado, se ha obtenido una proteina recombinante denominada NL1Tc similar a la endógena que codifica L1Tc mediante sistemas de expresión procariotas y eucariotas basado en baculovirus recombinantes que posee actividad endonucleasa AP in vitro. Por último, se ha analizado la implicación de la región 5'de L1Tc en los procesos de transcripción y traducción mediante el colage de diferentes fragmentos de esta región corriente arriba del gen luciferasa, transfección de los epimastigotes de T. cruzi con los vectores resultantes y estudio de la expresión del gen luciferasa.