Purificación y estudio de las características estructurales de la invertasa de pichia anomala

Abstract

El tema de estudio de la tesis doctoral consistió en ampliar los conocimientos sobre el funcionamiento del sistema de glicosilación en las levaduras del genero Pichia. Para esto se plantearon dos objetivos iniciales: -Purificar y caracterizar la invertasa de Pichia anomala para deducir, de los datos que se obtengan, como opera el sistema de glicosilación en las de dicho genero. -Expresar el gen SUB2 que codifica para la invertasa de Sccharamyces cerevisiae, en la levadura Pichia anomala, para profundizar en el conocimiento de la estructura de los glicoproteinas heterologas producidas por especies del genero Pichia. Para conseguir el primer objetivo se purificó la invertasa de Pichia anomala y se estudiaron caracteristicas de la misma, tanto de tipo fisico-quimico, como por ejemplo el efecto del ph. De la temperatura y de concentración de algunos sustratos(sacaros y rafinosa) sobre la actividad, estabilidad de la enzima, como referidos a la composición y estructura del carbohidrato de la invertasa. En referencia al segundo de los objetivos, se expresó en Pichia anomala, el gen SUC2 de Saccharomyces cerevisiae determinandose algunas caracteristicas. Estructurales de la invertasa heteróloga producida por Pichia anomala.