Regulación de la expresión de la selectina-l en leucocitos por radicales libres de oxigeno (ros) y metaloproteasas

  1. Maria Jesus Dominguez Luis
Supervised by:
  1. Manuel Marino Ignacio Feria Rodríguez Director
  2. José Federico Díaz González Director

Defence university: Universidad de La Laguna

Year of defence: 2008

Committee:
  1. Luis Hernández Nieto Chair
  2. José David Machado Ponce Secretary
  3. Sagrario Bustabad Reyes Committee member
  4. Francisco Sánchez Madrid Committee member
  5. Raimundo Freire Betancor Committee member

Type: Thesis

Abstract

Diversos trabajos ya clásicos, han demostrado que la selectina-L, una molécula de adhesión que se expresa en los neutrófilos, sufre un corte proteolítico por la acción de una metaloproteasa de superficie durante la fase de rodamiento de la cascada de adhesión. Sin embargo, los mecanismos que regulan el procesamiento del ectodominio de la selectina-L y su significado fisiopatológico, durante la respuesta inflamatoria, están sin aclararse. En este trabajo, presentamos datos que muestran que la pérdida de expresión de la selectina-L y la producción de radicales libres de oxígeno (ROS) en neutrófilos humanos son eventos interrelacionados. En experimentos in vitro, el corte de la selectina-L es desencadenado en respuesta a un factor soluble producido por los neutrófilos, que actúa por un mecanismo autocrino-paracrino. Este factor es inestable y, además, es inhibido por compuestos antioxidantes, hecho que podría indicar que puede ser un ROS. Hemos observado que la producción de radicales libres por neutrófilos se inicia en respuesta a la interacción neutrófilo-endotelio, y va aumentando a lo largo del tiempo de interacción con la célula endotelial. Además, nuestros datos indican que la producción de ROS por neutrófilos puede ser un sistema fisiológico para regular la respuesta inflamatoria, mediante la inducción del corte de la selectina-L por un mecanismo que requiere la presencia de ADAM-17 o TACE. Diversos datos experimentales sugieren que otras metaloproteasas, además de TACE, pueden estar implicadas en el corte y liberación de la selectina-L en neutrófilos. EL ADAM-8, otro miembro de la familia ADAM, se expresa en varios tipos celulares incluyendo neuronas, osteoclastos y leucocitos, y además, está implicado en osteoclastogénesis y procesos neurodegenerativos. En este trabajo, se muestra que el ADAM-8 se expresa constitutivamente en la superficie celular y en los gránulos de neutrófilos humanos. Durante la activación celular in vitro e in vivo el ADAM-8 se sobreexpresa en la superficie de los neutrófilos y se libera al medio por la acción de una metaloproteasa. Tanto el ADAM-8 presente en la superficie celular como su forma soluble es capaz de procesar la selectina-L, lo que sugiere un papel muy relevante de esta metaloproteasa en la respuesta inflamatoria.