Las isoformas de la subunidad beta de la na,k-atpasadistribucion y regulacion de la expresion en celulas en cultivo de hipotalamo de feto de rata

  1. Emilia Lecuona Prats
Supervised by:
  1. Pablo Martín Vasallo Director

Defence university: Universidad de La Laguna

Year of defence: 1996

Department:
  1. Bioquímica, Microbiología, Biología Celular y Genética

Type: Thesis

Teseo: 54366

Abstract

En el sistema nervioso central se han descrito tres isoformas de la subunidad alfa y dos de la subunidad beta de la na, k-atpasa. En este trabajo se ha estudiado la distribucion regional, celular y subcelular de la subunidad beta y algunos aspectos de su regulacion. La isoforma betal se localiza en los somas de neuronas y astrocitos, y su distribucion no cambia a lo largo del desarrollo embrionario. Por el contrario, la distribucion subcelular de la isoforma beta2 es variable dependiendo del estadio del desarrollo: hasta el dia post-natal 10 su distribucion es similar a la de la isoforma betal pero a partir del dia post-natal 15 la isoforma beta2 se localiza exclusivamente en las prolongaciones astrocitarias sin que hayamos detectado su presencia en neuronas utilizando tecnicas de inmunocitoquimica. Tambien hemos estudiado la expresion de las isoformas de la subunidad beta de la na, k-atpasa en celulas de cultivos mixtos de hipotalamo de feto de rata en el dia prenatal 15. En estos cultivos la isoforma betal se expresa en el soma de neuronas y astrocitos y la beta2 en el soma de neuronas y astrocitos y en las prolongaciones neuronales. Finalmente hemos estudiado los efectos de algunas hormonas sobre la expresion de las isoformas de la subunidad beta de la na, k-atpasa. La insulina produce un incremento de la actividad na, k-atpasa a los 20 minutos del tratamiento que se acompaña de un incremento en la cantidad de isoforma beta2. Despues de 20 minutos se observa una disminucion tanto en el mrna como en la proteina que se corresponde con un cambio en la distribucion subcelular de esta isoforma, desapareciendo de las prolongaciones neuronales y quedando restringida solamente a los somas celulares. La aldosterona incrementa la actividad na,k-atpasa desde las 24 horas de tratamiento, elevacion que se detecta hasta las 120 horas. La primera que se observa aumentada es la betal y posteriormente, a las 120 horas, se observa un aum