Adquisición de resistencia secundaria en levaduras. Aproximación mediante mutagénesis activada por estrés (slam) bajo la hipótesis de mutagénesis adaptativa

  1. David Quinto Alemany
Supervised by:
  1. Mario Lorenzo Díaz González Director
  2. Cristina Gil Lamaignere Director
  3. Félix Machín Director

Defence university: Universidad de La Laguna

Year of defence: 2017

Department:
  1. Biología Animal, Edafología y Geología

Type: Thesis

Abstract

En los últimos años, diversas especies de microorganismos están adquiriendo resistencia a los tratamientos farmacológicos existentes. Esto sucede por un incremento en el porcentaje de patógenos intrínsecamente resistentes (resistencia primaria) o por adquisición de resistencia tras la exposición al fármaco (resistencia secundaria). A menudo la resistencia primaria se debe a mutaciones espontáneas surgidas de forma azarosa previa exposición al agente, mientras que en el segundo caso la resistencia surge propiamente como consecuencia del tratamiento y puede ser debida a cambios metabólicos o genómicos. Cuando son genómicos, éstos ocurren mediante mutaciones que permiten la adaptación del organismo al medio, fenómeno conocido como mutagénesis adaptativa. Heidenreich (2007) define la mutagénesis adaptativa como aquellos "procesos que permiten a células individuales de poblaciones no proliferantes adquirir mutaciones ventajosas gracias a las cuales superan la fuerte presión selectiva de las condiciones del medio que están limitando la proliferación". La exposición de Saccharomyces cerevisiae al agente antifúngico 5-fluorocitosina induce la adquisición de resistencia secundaria del organismo al fármaco debido a la aparición de mutaciones. La tasa de mutantes aparecidos con resistencia secundaria o adquirida, es superior a la de mutantes preexistentes (resistencia primaria). En un porcentaje significativo de mutantes con resistencia secundaria, esta resistencia aparece por mutaciones en el gen FCY2 (citosina permeasa). Este trabajo muestra que el modelo de estudio microbiológico desarrollado es extrapolable a otra especie de levadura, Candida albicans, frente al mismo agente, y a S. cerevisiae frente a un fármaco antifúngico de otra naturaleza, como la equinocandina caspofungina. Además se aborda el fenómeno en aislados clínicos de C. albinas y C. glabrata frente a caspofungina y se estudia la posible inducción de estrés oxidativo que pudiera estar relacionado con la respuesta celular o la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) que pudieran ser causa de las mutaciones observadas.