Formación de biopelículas de levaduras de interés clínico en catéteres y sondas urinarias

  1. María Dolores Estivill
Supervised by:
  1. María Pilar Arévalo Morales Director

Defence university: Universidad de La Laguna

Year of defence: 2011

Department:
  1. Obstetricia y Ginecología, Pediatría, Medicina Preventiva y Salud Pública, Toxicología, Medicina Legal y Forense y Parasitología

Type: Thesis

Teseo: 304148

Abstract

El incremento de las infecciones producidas por Candida, la gravedad que suponen, las dificultades que en la práctica clínica implica el diagnóstico y tratamiento de estos pacientes, ha motivado el interés en estudiar y evaluar la posible capacidad de adherencia y de formación de biopelículas de las principales especies del género Candida de interés clínico en tres tipos de biomateriales empleados frecuentemente en la rutina hospitalaria. Se plantean los siguientes objetivos: - Establecer la metodología experimental más adecuada para estudiar la adherencia y formación de biopelículas en Candida. - Evaluar comparativamente la adherencia y formación de biopelículas por medio de dos métodos de cuantificación para poder establecer el más adecuado en este tipo de estudios. - Establecer la posibilidad de que el origen de las cepas clínicas guardase relación con su capacidad de adherencia y formación de biopelículas intrínseca. - Comparar la capacidad de adherencia y formación de biopelículas intra-especie e inter-especies a los tres tipos de biomateriales. - Establecer la influencia de los biomateriales en la capacidad de adherencia y formación de biopelículas. En el estudio se utilizaron 84 cepas Candida spp (23 C. albicans, 23 C. parapsilosis, 16 C. tropicalis, 17 C. glabrata y 5 C. krusei) y se emplearon tres tipos de materiales sintéticos poliméricos que se utilizan en catéteres y sondas urinarias: Cloruro de polivinilo (PVC), Poliuretano y Teflón. Para la cuantificación se han utilizado dos métodos: espectrofotométrico y recuento de unidades formadoras de colonias por ml. La adherencia, el crecimiento y arquitectura de las biopelículas de Candida spp en los tres biomateriales se analizó de forma cualitativa a partir de las imágenes obtenidas mediante el Microscopio Electrónico de Barrido (MEB). Se concluye del estudio que: - Por el método espectrofotométrico, C. tropicalis fue la especie con la que se obtuvieron los valores más elevados tanto en la fase de adherencia como en la formación de las biopelículas, mientras que por el recuento de viables fue C. parapsilosis la que mostró una mayor recuperación de colonias en los dos períodos pero sin demostrarse diferencias significativas entre las dos especies. C. glabrata fue la especie que mostró menor capacidad de formación de biopelículas en los tres materiales estudiados con los dos métodos de cuantificación utilizados. - Todas las cepas ensayadas, de C. albicans, C. parapsilosis y C. tropicalis, mostraron mayor adherencia al PVC y la mayor producción de biopelículas con el Teflón. El poliuretano fue el material donde la adherencia y la producción de biopelículas de Candida spp fue menor. - No se pudo correlacionar la patogenicidad con el origen catéter al no demostrarse diferencias significativas entre la adherencia y formación de biopelículas de las cepas procedentes de catéter y la obtenida con las cepas de otros orígenes. - La Observación mediante el Microscopio Electrónico de Barrido fue muy útil para la caracterización y el estudio del desarrollo de las biopelículas de las distintas especies de Candida sobre la superficie de los catéteres evaluados. Las características morfológicas de las biopelículas y la matriz extracelular en diferentes catéteres procedentes de pacientes con infección por Candida, fueron muy similares a las observadas con el modelo experimental ensayado.