Caracterización de los canales de la subfamilia TREK (K2P) en neuronas del ganglio cervical superior en cultivo

  1. Alba Cadaveira Mosquera
Supervised by:
  1. Antonio Reboreda Prieto Director
  2. José Antonio Lamas Castro Director

Defence university: Universidade de Vigo

Year of defence: 2014

Committee:
  1. Félix Viana de la Iglesia Chair
  2. Teresa Giraldez Fernandez Secretary
  3. Xavier Gasull Casanova Committee member

Type: Thesis

Abstract

En neuronas simpáticas del ganglio cervical superior (GCS) el potencial de reposo está controlado por un mecanismo complejo en el que intervienen varias corrientes voltaje dependientes, la bomba de Na+/K+ y una corriente de fuga principalmente de K+ cuyo sustrato molecular era desconocido. El descubrimiento en 1996 de los canales K2P y su participación en el mantenimiento del potencial de reposo en varios tipos celulares, los reveló como los principales candidatos para transportar la corriente de fuga. Esta familia de canales está compuesta de seis subfamilias y 15 subunidades que se encuentran ampliamente distribuidas en todo el sistema nervioso somático central y periférico";" sin embargo, hasta la realización de este trabajo su expresión en el sistema nervioso autónomo era desconocida. Los resultados obtenidos muestran que las neuronas del GCS expresan mRNA de los tres miembros de la subfamilia TREK (TREK-1, TREK-2 y TRAAK) con un predominio de TREK-2 cuantificado mediante RT-qPCR, el marcaje con anticuerpos específicos muestra también la presencia de los tres miembros de la subfamilia. La aplicación de riluzol, activador de canales de la subfamilia TREK, en experimentos de patch perforado en neuronas en cultivo activa una corriente transitoria resistente a bloqueantes clásicos de potasio, que se incrementa con Zn2+ y se bloquea por fluoxetina. El perfil farmacológico y la cuantificación de los resultados de canal individual indican que la mayor parte de la corriente activada por riluzol fluye a través de TREK-2. A nivel funcional se observa que los canales TREK-2 contribuyen al mantenimiento del potencial de reposo e influyen en el patrón de disparo evocado por estímulos eléctricos, son por lo tanto un regulador importante de la excitabilidad de las neuronas del GCS.