Regulacion de la asimilacion de nitrato en chlamydomonas reinhardtiiidentificacion de mecanismos de regulacion por fosforilacion/desfosforilacion

Resumen

En Chamydomonas reinhardtii la ruta de asimilación de nitrato está regulada de forma muy precisa por condiciones nutricionales y ambientales. El objetivo de este trabajo ha sido determinar los mecanismos a través de los cuales se lleva a cabo esta regulación, y la implicación de los mecanismos de fosforilación/desfosforilación y unión a proteínas 14-3-3 en estos procesos de regulación. Los resultados muestran que la presencia de calcio intracelular, que media la activación de proteínas quinasas dependientes de calciocalmodulina, da lugar a la regulación transcipciona negativa de los Sistemas I y II de transporte de nitrato/nitrito. La presencia de elevados niveles de AMPc, inducidos por isobutil metil xantina, genera una señal negativa para la regulación postraduccional de los Sistemas I, II y III de transporte de nitrato/nitrito. Al mismo tiempo, llevamos a cabo la fosforilación de un oligopéptido de la secuencia de la proteína NAR2, integrante de los Sistemas I y II. Determinamos, asimismo, que la NR de C. reinhardtii no regula su actividad, de la misma forma que en plantas, por un mecanismo de fosforilación y unión a proteínas 14-3-3, pero la isoenzima GS1 de la glutamina sintetasa se fosforila por una PK dependiente de calciocalmodulina y se une a proteínas 14-3-3. Analizamos que el NO3 es una señal nutricional que regula no sólo su propio proceso de asimilación a través de productos derivados de su reducción, sino también, por sí mismo, es una señal reguladores para otros procesos celulares, como la gametogénesis, en C. reinhardtii.