Characterization of the antifungal and antitumour activities of peptides derived from the complementarity-determining regions of the monoclonal antibody c7

  1. Jonathan Cabezas Olcoz
Supervised by:
  1. María Dolores Moragues Tosantos Director

Defence university: Universidad del País Vasco = Euskal Herriko Unibertsitatea

Year of defence: 2011

Committee:
  1. María Jesús Sevilla García Chair
  2. Elena Eraso Barrio Secretary
  3. María Pilar Arévalo Morales Committee member
  4. Luciano Polonelli Committee member
  5. Ángel Domínguez Olavarri Committee member

Type: Thesis

Teseo: 313532 DIALNET lock_openTESEO editor

Abstract

En las últimas décadas, la incidencia de micosis ha incrementado notablemente, especialmente en pacientes con factores predisponentes tales como aquellos que reciben quimioterapia o los afectados por el VIH. El pequeño repertorio de antifúngicos, la toxicidad de algunos de ellos y la aparición de cepas fúngicas resistentes ha impulsado el estudio de nuevas moléculas con propiedades antifúngicas. Por otro lado, la tasa de pacientes con cáncer también ha aumentado en los últimos años, y el fracaso de algunas terapias demanda nuevas moléculas con actividad anticancerígena. Basados en la inmunidad innata, los anticuerpos y sus derivados se han revelado como importantes herramientas para tratar y complementar las terapias antifúngicas y antitumorales en vigor. En este trabajo hemos caracterizado la actividad antifúngica y antitumoral de seis péptidos (H1, H2, H3, L1, L2 y L3) derivados de las regiones de complementariedad del anticuerpo monoclonal C7. La actividad antitumoral fue estudiada sobre seis líneas tumorales midiendo la actividad metabólica de las células tras ser expuestas a distintas concentraciones de cada péptido y del mAb C7, a través del ensayo de reducción del MTT. Entre los seis péptidos analizados, el H2 fue el que mayor actividad antitumoral mostró, seguido por el L1 y L3. La actividad antifúngica de los seis péptidos fue testada siguiendo la metodología publicada por el CLSI. El péptido H2 fue de nuevo el más activo, incluso sobre cepas de levadura resistentes a antifúngicos. Además, aislamientos de Candida albicans que sólo crecen como levadura fueron más sensible al H2 que aquellos que sólo crecen con forma filamentosa. Los péptidos L2 y L1 fueron otros los otros dos que mostraron cierta actividad antifúngica. Aunque sólo el péptido H2 mostró cierta actividad antifúngica sobre aislamientos de Fusarium solani y Aspergillus niger, en general todos ellos fueron poco activos frente a cepas de hongos filamentosos. Sin embargo, el H2 en combinación con voriconazol ejerció una actividad sinérgica frente a algunos aislamientos de hongos filamentosos. Esta actividad sinérgica fue corroborada entre el H2 y el fluconazol en un modelo in vivo de candidiasis sistémica, establecido con una cepa de C. albicans susceptible dosis dependiente al fluconazol. La combinación de ambas moléculas aumentó la supervivencia de los animales infectados además de reducen la carga fúngica en riñones y cerebro. Las actividades mostradas por el péptido H2 refuerzan la hipótesis de su utilización solo o en combinación en terapias antifúngicas y antitumorales.