Desarrollo y optimización de pcr cuantitativas a tiempo real para la detección y discriminación de secciones y especies de interés del género aspergillus

Resumo

Las aspergilosis son infecciones causadas por hongos oportunistas del género Aspergillus. Entreellas, destaca la aspergilosis invasora por ser una importante causa de mortalidad en pacientesinmunodeprimidos. Aspergillus fumigatus es el agente etiológico más frecuente, seguido de A.flavus, A. niger, A. terreus, y otras especies con mucha menor incidencia. La falta de métodosdiagnósticos rápidos que detecten y discriminen el agente causal de la infección hace que eltratamiento sea tardío y colabora en la elevada mortalidad de las aspergilosis. Por ello, a lo largode este trabajo se desarrollaron sistemas de PCR cuantitativas a tiempo real para discriminar deforma rápida, sencilla y fiable, las especies y secciones de mayor relevancia clínica del géneroAspergillus en una misma reacción. Estas técnicas se optimizaron, se determinó la sensibilidadanalítica de cada una de ellas y se comprobó su especificidad aplicándolas a una extensacolección de microorganismos. Además, se evaluó su utilidad como herramienta diagnóstica enun modelo murino de infección diseminada experimental y en muestras de lavadobroncoalveolar humano.