Efecto del anticuerpo monoclonal c7 y dos de sus cdrs frente a la infección invasora experimental por scedosporium prolificans

  1. Dalila del Carmen Montañez Grael
Supervised by:
  1. María Jesús Sevilla García Director

Defence university: Universidad del País Vasco = Euskal Herriko Unibertsitatea

Year of defence: 2012

Committee:
  1. Guillermo Quindós Andrés Chair
  2. María Dolores Moragues Tosantos Secretary
  3. María Pilar Arévalo Morales Committee member
  4. Josep Guarro Artigas Committee member
  5. Pilar Regulez Ariño Committee member

Type: Thesis

Teseo: 115702 DIALNET

Abstract

En los últimos años se ha observado un incremento importante de infecciones fúngicas oportunistas causadas por especies de Scedosporium y Pseudallescheria, que son complicaciones graves para pacientes inmunocomprometidos, neutropénicos, pacientes con enfermedades oncohematológicas y sometidos a trasplantes. La escedosporiosis es reconocida como la enfermedad fúngica más letal, principalmente por su alta morbilidad y mortalidad (60-100%), su elevado grado de virulencia, y su multirresistencia intrínseca a la mayoría de los agentes antifúngicos tradicionales disponibles en el mercado. En nuestro trabajo estudiamos 8 cepas de Scedosporium prolificans y 1 cepas de Scedosporium apiospermum, realizamos la identificación tradicional mediante características macroscópicas y microscópicas e incorporamos la identificación mediante técnicas moleculares específicas para la discriminación de S. prolificans.Los ensayos in vitro de sensibilidad fúngicas y reducción del MTT, nos demuestran que el AMc reduce significativamente de la viabilidad de S. prolificans en comparación con una IgM irrel. y que respecta a la actividad de los CDRs probados, se apreció que algunas cepas de S. prolificans mostraron alguna sensibilidad; pero la cepa S. prolificans UPV 99-059, UPV 98-535, ATCC 201214 y S. apiospermum UPV 93-251 no mostró sensibilidad a los CDRs probados. Mientras que C. parapsilosis ATCC 22019 mostró una gran sensibilidad al péptido H2 y A. flavus ATCC 204305 mostró cierta sensibilidad al péptido L1. Las cepas Scedosporium spp. fueron resistentes a los agentes antifúngicos en un rango de CMI y CMI50 ¿ 16 µg/ml, y de CMI50 ¿ 77,75 µM para el AMc C7 y sus CDRs derivados. El AMc C7 y sus CDRs no lograron inhibir el crecimientos de las cepas de Scedosporium spp. Como alternativa a este problema se evaluaron combinaciones de antimicrobianos, encontrándose indiferentes en todas las combinaciones de CDRs del AMc C7 y los agentes antifúngicos utilizados. En nuestro modelo de escedosporiosis invasora el tratamiento con anidulafungina (10mg/kg/día) y micafungina (10mg/kg/día) durante 10 días post-infección, supervivencia final del 20% y 10%, respectivamente; ambos tratamientos incremento ligeramente la supervivencia de los animales infectados, y el control presentó una mortalidad del 100%.Para los tratamiento con AMc C7 y CDRs, los mismos mostraron un efecto protector limitado sobre la supervivencia de animales infectados con S. prolificans UPV 99-059, los tratamientos con la monoterapia con el monoclonal C7 (400 µg/animal) únicamente incrementaron el TMS. La terapia combinada con C7 + MCF incremento el TMS y prolongó la supervivencia final un 16,67%, mientras que los animales control (no tratados) presentaron una mortalidad del 100%. Además, la monoterapia con L1 (400 µg/animal) fue la más efectiva, prolongó significativamente la supervivencia de los animales infectados en un 28,6% con respecto al grupo control que presentó una mortalidad del 100% a los 21 días después de la infección. Aunque los tratamientos con CDRs derivados del AMc C7, son estudios muy preliminares, parecen sugerir que estas moléculas podrían ser una buena alternativa en los tratamientos con péptidos sintéticos, representan una posibilidad para el desarrollo de nuevos tratamientos para la escedosporiosis sistémica.