Caracterización de genes implicados enla translocación de polipéptidos a través de la membrana del retículo endoplásmico en la levadura patógena. Candida albicans

  1. José Manuel de La Rosa Reyes
Supervised by:
  1. Luis Rodriguez Dominguez Director
  2. Teresa Ruiz Martín Director

Defence university: Universidad de La Laguna

Year of defence: 2001

Committee:
  1. Enrique Herrero Perpiñan Chair
  2. Milagros León Barrios Secretary
  3. José Manuel Siverio Expósito Committee member
  4. Francisco Rey Iglesias Committee member
  5. Basilio Valladares Hernández Committee member

Type: Thesis

Teseo: 89025

Abstract

Con objeto de contribuir al mejor conocimiento de los mecanismos de secreción de proteínas, en este trabajo nos propusimos iniciar el estudio de algunos de los componentes implicados n la translocación de polipéptidos a través de la membrana del retículo endoplásmico RE en la levadura Candida albicans, teniendo en cuenta, además, la importancia de este organismo desde el punto de vista clínico. Mediante la transformación de mutantes de Saccharonyces cerevisiae, afectados en el gen SEC61, con una genoteca de DNA genómico de c. Albicans construida en un vector autorreplicativo se aislaron tres clones diferentes, denominados pCA18, pCA47 y pCA51, capaces de complementar el fenotipo termosensible de los mutantes.Dichos clones fueron capaces, además, de desbloquear, al menos paracialmente, la secreción de invertasa y de carboxipeptidasa y cuando la cepa mutante se incubó a la temperatura restrictiva. De éstos, tan sólo el denominado pCA47 contiene un gen cuyo producto puede estar directamente relacionado con el mecanismo de translocación de proteínas en la membrana del RE: el gen SPC3, el cual codifica uno de los componentes del complejo de la peptidasa señal. El gen SPC3Ca fue capaz de complementar el fenotipo termosensible de mutantes spc3 y sec61 de S. Cerevisiae. Sin embargo, a diferencia de lo que ocurre con el gen homólogo de esta especie, el gen SPC23 de C. Albicans no complementó la termosensibilidad de un mutante sec 11 de S. Cerevisiae.Dicha complementación habla a favor de la estrecha relación funcional que debe existir entre los complejos proteicos que constituyen el translocón y la pepetidasa señal.Los dos clones restantes aislados por complementación (pCA18 y pCA51) no parecen contener elementos, al menos conocidos, que se relacionen con el fenómeno de la translocación. Por otra parte, medianye hibridación con una sonda homóloga, se consiguió aislar el gen SEC 61 de C. Albicans a partir de una gen