Papel inmunomodulador de las exovesículas de Trypanosoma cruzi en la enfermedad de Chagas

Résumé

La enfermedad de Chagas (EC) o tripanosomiasis americana identificada en 1909 por Carlos Chagas, es una de las 10 enfermedades mas olvidadas y desatendidas que afectan a las poblaciones pobres en las Américas. Con 8 a 10 millones de personas ya infectadas y hasta 120 millones de personas en riesgo de infección, se ha extendido a Europa, Estados Unidos, Canadá y Japón. Esta parasitosis es causada por T. cruzi, un hemoparásito, protozoo flagelado que es transmitido por la picadura de un chinche triatomino, que en sus heces contiene el parásito, aunque existes otras diversas vías de transmisión. Hemos estudiado como la respuesta inmune levantada por las diferentes preparaciones, difieren tanto con el tipos de inoculo (EVs, EVs tratada térmicamente y sus respectivos inmunocomplejos) como en el órgano donde se acumulan (hígado o bazo) en relación con el tiempo. Los hallazgos de este estudio refuerzan el concepto de que un delicado equilibrio entre las citocinas reguladoras e inflamatorias representa un elemento clave en el establecimiento de las distintas formas de la EC crónica, ya sea en modelos experimentales murinos como humanos. La evaluación de las propiedades fisicoquímicas de las EVs, como el tamaño, la forma, la carga superficial, la densidad y la elasticidad, es necesaria para determinar sus interacciones biológicas. De manera que la determinación precisa de estas propiedades se ha hecho de forma rutinaria durante todo el proceso de experimentación. Cada metodología utilizada aportó información imprescindible en nuestra experimentación ya que los diversos métodos son útiles dependiendo de los objetivos trazados. La información tanto del tamaño (DLS) como el contenido (Western Blot), ha complementado los hallazgos confirmados por las técnicas microscópicas (confocal, SEM. TEM, y AFM), y los estudios mediante inmunoquímica. En consecuencia, con el fin de comprobar la adhesión de EVs de tripomastigotes de T. cruzi y las interacciones con la superficie de las células, se estudio la captación de EVs en células Vero y macrófago a través de diversas microscopias, encontrado que la célula puede utilizar varias vías de internalización, que puede ser las dependiente de clatrina, caveolina o cualquier otra dependiendo del tamaño de la EVs y el tipo de célula.