Aislamiento y caracterizacion genetica e inmunologica de proteinas antigenicas de leishmania (v.) braziliensis

Abstract

Se han aislado del parásito L. (V.) braziliensis (MHOM/PE/95/LQ2) las proteínas antigénicas pLb99 y pLb87, las que son reconocidas por sueros de pacientes con leishmaniasis en un 79,49% y 94,87% respectivamente. Se identificó la proteína pLb87, la cual corresponde a una proteína de choque térmico de 83 kDa. Se aisló el gen de la Hsp83 que consta de 2091 pares de bases y se encuentra una copia única en el genoma del parásito. Se expresa la proteína Hsp83 recombinante y se realizó un mapeo antigénico produciendo cuatro fragmentos recombinantes. Con la proteína recombinante completa así como con los fragmentos, se realizó estudios de reconocimiento por los sueros de pacientes con leishmaniasis y sueros de otras patologías. Se evaluaron los epítopes conformacionales y epítopes lineales presentes en ellos, con el fin de realizar la caracterización inmunológica. El porcentaje de sensibilidad de la proteína rLbHsp83 desnaturalizada es 53,23% y la sensibilidad de los fragmentos desnaturalizados rLb83-F1, rLb83-F2, rLb83-F3 y rLb83-F4 son 43,97%, 56,34%, 48,34% y 52,48% respectivamente. El porcentaje de sensibilidad de la proteína rLbHsp83 no desnaturalizada es 71,94% y la sensibilidad de los fragmentos no desnaturalizados son 39,29%, 60%, 39,29% y 51,42% respectivamente. La proteína rLbHsp83 no desnaturalizada es el antígeno que tiene las mejores características para ser utilizada para el diagnóstico inmunológico de leishmaniasis.