Actividad citotóxica y antiproliferativa de flavonoidesestudio experimental in vitro

Abstract

Realizamos el estudio de los posibles citotóxicos (tratamientos durante 24 horas) y antiproliferativos (tratamientos 72 horas) de trece compuestos fenólicos sobre las líneas de melanoma B16F10 y SK-MEL-1 y de melanocitos no neoplásicos Melan-a comparándolos con el melfalán. Los compuetos fenólicos no eran solubles en el medio de cultivo siendo necesario disolverlos en DMSO, obteniendo una solución stock a partir de la cual se prepararon las soluciones de trabajo. La máxima concentración ensayada en los compuestos fenólicos (50 uM) estuvo condicionada por la solubilidad de las sustancias y para que la concentración de DMSO en los cultivos no superara el 1%. Cuantificamos la viabilidad celular de los cultivos tratados y controles mediante el ensayo colorimétrico con MMT adaptando los métodos de Carmichael y Alley, que implica el uso de la sal de tetrazolio MTT que es metablizada a una sal coloreada (formazán) por la actividad de la enzima mitocondrial succinato deshidrogenasa. El método estadístico empleado consistió en un análisis de la varianza de medidas repetidas complementando con contraste de igualdad de pares con el método de la mínima diferencia significativa. Los valores de LD50 han sido obtenidos a partir de la curva ajustada a los promedios de los cocientes de absrobancia respecto al control. Nuestros resultados mostraron que ninguno de los compuestos ensayados, sobre las líneas de melanoma utilizadas, originó un efecto citotóxico comparable al del melfalán que mostró diferencias significativas (p<0,05) respecto a los cultivos tratados con los distintos compuestos fenólicos. Sobre la línea Melan-a el efecto fue moderado o nulo excepto el mostrador por la baicaleina y miricetina a concentraciones superiores a 12,5 uM. Como observamos a partir de nuestros resultados, las tres líneas celulares mostraron diferente sensibilidad a los compuestos ensayados: las líneas de melanoma fueron más sensibles a