Estudio de la fenalenona como agente fotosensibilizador en células promielocíticas derivadas de leucemia humana (h-60)caracterización de las vías de señalización intracelulares implicadas en la apoptosis

Abstract

La terapia fotodinámica TFD es un procedimiento emergente y de enrome potencial terapéutico para el tratamiento local de tumores y otras enfermedades no cancerígenas como la psoriasis. El método se basa en la irradiación con luz visible del tejido diana para activar a un agente fotosensibilizador (FS) acumulado en la célula transformada. La interacción del FS, en su estado excitado, con el oxígeno lleva a la formación de oxígeno lleva a la formación de oxígeno singlete (1O2)o y otras especies reactivas del oxígeno (ROS). La generación de este estrés oxidativo conducirá a la célula hacia la muerte, frecuentemente, a través de un proceso apoptótico. Existen cientos de compuestos naturales y sintéticos capaces de funcionar como fotosensiblizadores. Nosotros hemos centrado este trabajo en la fenalenona (PN), un compuesto acreditado como eficiente fotosensiblizador de 1O2 en sistemas no biológicos. En este trabajo investigamos las propiedades fotodinamicas de la PN en sistemas biológicos usando células HL-60. Primero caracterizamos las condiciones fotodinámicas por las que este compuesto ejerce su acción fototóxica en esta línea celular. A continuación, determinamos cómo estos efectos fototóxicos son el resultado de un proceso apoptótico mediado por la generación de ROS, siendo el 1O2 la molécula iniciadora del estrés oxidativo. Al estudiar el proceso en profundidad, encontramos que la apoptosis se induce fundamentalmente a través de la ruta intrínseca mitocondrial, produciendo una desvalorización de la membrana mitocondrial, liberación de citocromo c al citosol y activación de las caspasas 9 y 3. Nuestros datos muestran como la caspasa-8, a través de la activación de Bid, y p38-MAPK se comportan como señales proapoptóticas, colaborando en la inducción de la ruta intrínseca a través de la desmoralización mitocondrial. Por el contrario, la PN-TFD induce la ruta iniciada por la activación de PI3k/PKB así como l