Funcion de la membrana peribacteroidea en el metabolismo energético de la simbiosis rizobioleguminosa

Abstract

Se ha estudiado la presencia de ATPasa en la membrana peribacteroidea de simbiosomas de nódulos radicales de soja infectada con Bradyrhizobium japonicum USDA110. Para obviar el problema de la contaminación cruzada con otras fracciones nodulares de desarrolló un protocolo de purificación más exhaustivo que los empleados habitualmente por otros grupos de investigación. La actividad ATPasa de determinó i) mediante valoración enzimática del ADP producido, ii) mediante valoración colorimétrica del fosfato, iii)por HPLC de los hicleótidos de adenina. Los diferentes tipos de ATPasas se distinguieron por su dependencia del pH y por el empleo de inhibidores específicos. No se encontró actividad ATPasa P ni V enlos sibiosomas. El empleo de técnicas inmunológicas tampoco permitió la detección de ATOasas en simbiosomas, si no se encontró energización de la membrana perribacteroidea dependiente de ATP o de pirofosfato. Estos datos contradicen el modelo comúnmente aceptado en el que la presencia de una ATOasa en la membrana peribacteroidea es indispensable para el transporte de solutos entre los simbiontes. Se concluye que la presencia de ATPasa comunicada por otros autores puede deberse a contaminación con otras fracciones subnodulares, lo que implica la necesidad de cambiar el modelo establecido para la simbiosis rizobio-leguminosa. Además, se ha encontrado una actividad adenilato kinasa asociada a los simbiosomas, que se activa tras su solubilización con urea o detergentes no iónicos. Esta actividad es cinéticamente distinguible de otras adenilato kinasas nodulares, y puede desempeñar un papel importante en el proceso simbiótico.