Nuevas fuentes terapéuticas de origen natural frente al género acanthamoeba,

Résumé

La presente tesis doctoral se ha desarrollado en el Instituto Universitario de Enfermedades Tropicales y Salud Púbica de Canarias, dentro del Programa de Doctorado en Ciencias Médicas y Farmacéuticas, Desarrollo y Calidad de Vida, y dentro del departamento de Obstetricia, Ginecología, Pediatría, Medicina Preventiva y Salud Pública, Toxicología, Medicina Legal y Forense y Parasitología de la Universidad de La Laguna, en el área de Parasitología. La línea de investigación que se ha marcado para la consecución de este trabajo se enfoca en los estudios de quimioterapia antiparasitaria a partir de compuestos de fuentes naturales frente al género Acanthamoeba. Acanthamoeba es un género de amebas ubicuo y que pueden actuar como parásitos oportunistas, tanto de humanos como animales, causando diversas patologías oculares, nerviosas y dérmicas. La primera vez que se describió un caso clínico de queratitis por Acanthamoeba (QA) fue en 1974 y, tras el establecimiento del agente causal y de la enfermedad, se verificó un aumento de la incidencia de QA, en paralelo con el aumento de usuarios de lentes de contacto (LC), el cual es considerado como el principal riesgo de QA. Ésta se caracteriza por una ulceración de la córnea la cual, si el tratamiento no se administra a tiempo, puede llevar a un daño ocular severo, perdiendo progresivamente la agudeza visual y desencadenando finalmente la ceguera o una posible enucleación. Por otro lado, a pesar de los avances en la terapia frente a Acanthamoeba, el manejo de los pacientes con infecciones por este parásito sigue siendo un reto para los servicios sanitarios. Existen muchas limitaciones, incluso con terapias combinadas, y los resultados son efectivos sólo en los casos en los que se instaura un tratamiento precoz. Por todo ello, surge la necesidad de buscar nuevos principios activos frente a estos protozoos. En la presente tesis se evaluaron in vitro diferentes principios activos aislados de fuentes de origen natural frente a los estadios de trofozoíto y quiste de las amebas del género Acanthamoeba. En este sentido, a partir de los metabolitos secundarios del zoantario Palythoa aff. clavata se aislaron diferentes compuestos que demostraron actividad amebicida frente a diferentes cepas de Acanthamoeba. Siendo las moléculas 4-epi-arbusculina A (11) y isobadgerina (2) las que demostraron mayor actividad antiparasitaria y el desarrollo de muerte celular programada en la cepa A. castellanii Neff. Los metabolitos aislados de la planta del género Annona destacan por su potente actividad citotóxica, antibacteriana, antioxidante, como vasodilatador o antiinflamatoria. No obstante, a pesar del importante número de registros etnofarmacológicos de diferentes culturas, existen pocos informes sobre el uso del género Annona para tratar enfermedades parasitarias. En este estudio se ensayó in vitro la actividad amebicida de los compuestos squamins C-F (1-4), cuatro ciclooctapéptidos aislados a partir de los extractos de las semillas del frutal Annona globiflora, frente a los estadios de trofozoíto y quiste de Acanthamoeba castellanii Neff, A. polyphaga, A. quina y A. griffini, demostrando actividad amebicida e induciendo una muerte celular programada en la cepa A. castellanii Neff. Las algas pardas, como Gongolaria abies-marina, presentan moléculas bioactivas de interés, entre ellas algunas con actividad antiprotozoaria. En este estudio se realizó un ensayo bioguiado a partir de los extractos y fracciones de la especie Gongolaria abies-marina frente a diferentes especies de Acanthamoeba. Se aislaron seis meroterpenos empleando diferentes métodos de separación por cromatografía en columna: gongolarones A (1), B (2) y C (3), el cystomexicone B (4), la 1′-metoxiamentadiona (5) y la 6Z-1′-metoxiamentadiona (6). Todos los compuestos mostraron actividad amebicida frente a cepas de Acanthamoeba castellanii Neff, A. polyphaga y A. griffini. Los trofozoítos tratados con los gongolarones A (1) y C (3) desencadenaron una muerte celular programada en Acanthamoeba spp. Además, los compuestos 1 y 3 inducían el proceso de autofagia e inhibían el proceso de enquistamiento en A. polyphaga.