Automatización del proceso de identificación y caracterización de espigas resultantes de fenómenos de exocitosis registrados con técnicas amperométricas

Resumen

En este trabajo se propone una solución global al problema de la detección y el análisis de las señales amperométricas procedentes de fenómenos de exocitosis. La exocitosis se suele denominar secreción cuántica, ya que cada evento procede de la liberación de un gránulo, del medio intracelular al exterior. La amperometría es una técnica electroquímica que permite detectar cada fenómeno exocitótico individualmente, obteniéndose lo que se suele llamar espiga. La morfología de las espigas nos proporciona valiosa información sobre la forma de liberación que utilizan las células, de ahí la importancia de realizar un exhaustivo análisis cinético de las mismas. En esta memoria se detalla la puesta a punto de un sistema de registro amperométrico con una relación señal/ruido de calidad, necesaria debido a la pequeña magnitud de estos registros, del orden de pA. Además se incluye el diseño de diversos filtros digitales, específicamente orientados a las señales amperométricas. Por otra parte, el análisis cinético de las espigas de forma manual se hace inviable por el tiempo y esfuerzo que supone al investigador. El objetivo fundamental de este trabajo es la automatización completa de este análisis, garantizándose velocidad y comodidad, además de evitarse la subjetividad del análisis manual. Como resultado, se ha obtenido una aplicación informática eficiente y flexible, adaptable a distintos tipos de señales, por lo que se posibilita su utilización por otros grupos de investigación, incluso para otro tipo de señales.