Asimilación de nitrato en la levadura Hansenula polymorphamecanismos moleculares de la regulación postraduccional del transportador de nitrato Ynt1

Resumo

Esta tesis doctoral está dedicada fundamentalmente al estudio del mecanismo de regulación de la proteína Ynt1, una proteína que se encuentra en la membrana plasmática de la levadura Hansenula polymorpha y que transporta nitrato y nitrito con alta afinidad al interior de las células. Dentro de las células el nitrato es utilizado para sintetizar los componentes celulares nitrogenados. Los resultados del presente trabajo sugieren que la entrada de nitrato se regula controlando la cantidad de Ynt1 en la membrana plasmática en función de la fuente de nitrógeno. De esta forma, cuando las células disponen de fuentes de nitrógeno más favorables que el nitrato para crecer, se prescinde del transportador de nitrato enviándolo a la vacuola para ser degradado, un proceso que requiere la unión covalente de la proteína ubiquitina a Ynt1 como señal para que sea endocitado. La ubiquitina se une preferentemente a residuos de lisina localizados en un amplio dominio citosólico de Ynt1. Por otro lado, en este mismo dominio hemos identificado residuos de senina que se fosforilan también en función de la disponibilidad y calidad de la fuente de nitrógeno. La fosforilación de estos residuos, que ocurre en ausencia de nitrógeno, permite aumentar la estabilidad de Ynt1. Por tanto, fosforilación y ubiquitinación controlan la cantidad de Ynt1 y con ello, la entrada de nitrato a las células. Estos resultados contribuyen a la comprensión, en términos moleculares, de la regulación de los transportadores de nitrato en eucariotas.